Криопротокол отзывы результаты: Удачный криопротокол после неудачного ЭКО – отзывы ✔️

Содержание

Удачный криопротокол после неудачного ЭКО – отзывы ✔️

Только для трети женщин первый протокол ЭКО удачный. Всем остальным приходится повторно проходить через эту процедуру. Обычно используется ЭКО в естественном цикле либо криопротокол после неудачного ЭКО. Преимуществом криопротокола является то, что он позволяет не только упростить весь процесс и улучшить переносимость лечения для женщины, но и повысить шансы зачать ребенка.

Особенности криопротокола

Во время первой попытки ЭКО, женщине обычно проводят гормональную стимуляцию овуляции (за исключением программы ЭКО в ЕЦ). В результате созревает намного больше яйцеклеток, чем может быть использовано в текущем цикле экстракорпорального оплодотворения. Остаются лишние эмбрионы, которые могут быть заморожены для последующих попыток ЭКО.

В случае неудачи, уже через один цикл можно вступать в криопротокол. При наличии замороженных эмбрионов хорошего качества, нет необходимости снова проводить стимуляцию овуляции, пунктировать яичники для извлечения ооцитов, оплодотворять их и культивировать эмбрионы.

Записаться на прием

В программах с криопротоколом проводится только подготовка эндометрия и перенос эмбрионов в полость матки в оптимальный день для благополучной имплантации. Эндометрий должен быть синхронизирован со стадией развития эмбриона.

У некоторых женщин криопротокол может быть проведен с заместительной гормональной терапией или в стимулированном цикле, если того требует ситуация. Чаще это делается в случае эндокринного бесплодия.

Естественно, криопротокол после ЭКО с собственными эмбрионами невозможно провести, если ответ на стимуляцию в предыдущем цикле был слабым, и лишних эмбрионов, которых можно было бы заморозить, не осталось. Или они были, но плохо развивались и не доживали до дня криопереноса. И если такое повторялось несколько раз, то удачный криопротокол может быть проведен только с применением донорских эмбрионов.

Подготовка к криопротоколу

Чтобы увеличить шансы на удачные крио протоколы ЭКО, врач должен убедиться, что яичники полностью восстановились после предшествующей стимуляции овуляции. Женщина снова сдает некоторые анализы и проходит обследования (только те, которые ограничены по сроку годности, или дополнительные, по усмотрению врача).

Но самое важное – это выяснить сначала причину неудачи ЭКО!

В случае неудачного протокола ЭКО, пациентам «ВитроКлиник» предоставляется бесплатная консультация врача-репродуктолога, во время которой проводится УЗИ, назначается дальнейший план действий (дополнительные обследования супругов, подбираются другие схемы и методы).


Для повышения вероятности удачного криопротокола ЭКО у пациентов есть возможность посетить совместный прием репродуктолога и эмбриолога (особенно эта консультация будет полезна для пациентов, из других медицинских центров, которые после неудачной попытки решили обратиться в «ВитроКлиник»).

При таком формате врач репродуктолог вместе с эмбриологом внимательно изучают предыдущие попытки, схемы стимуляции и т.д., назначают дополнительные обследования женщине (например, генетические анализы крови) и её супругу (более углублённое изучение спермы, анализы крови на генетическую патологию). Возможно, потребуются консультации других специалистов (генетика, иммунолога и др.).

Вероятность успеха

По последним данным медицинской статистики, удачный криопротокол ЭКО имеет более высокую вероятность, чем наступление беременности в «свежем» цикле. Это объясняется более тщательной подготовкой:

  • учёт причин неудач;
  • отсутствие гормональной стимуляции овуляции;
  • назначение препаратов только для подготовки эндометрия;
  • хорошая синхронизация эндометрия матки со стадией развития эмбрионов.

Удачные криопротоколы более вероятны ещё и потому, что для криоконсервации изначально отбираются только эмбрионы самого лучшего качества.


Процент наступления беременности после криопротокола может доходить до 70%!

Уже тысячи женщин добились наступления беременности благодаря тому, что им провели удачный криопротокол. Отзывы самих пациенток свидетельствуют о том, что эта программа ЭКО значительно лучше переносится и имеет хорошие шансы на успех.

Свежий перенос эмбрионов или криоперенос

Свежий перенос эмбрионов или криоперенос — что выбрать?

Со времени рождения первого ребенка, зачатого с помощью процедуры экстракорпорального оплодотворения, были сделаны значительные прорывы в области вспомогательных репродуктивных технологий. Одним из самых успешных и применяемых методов стал метод криоконсервации репродуктивных клеток и тканей.

С быстрым развитием методов криоконсервации перенос замороженных  эмбрионов стал альтернативой переносу в свежем цикле.

Свежий перенос – это перенос эмбрионов в полость матки в том же цикле, когда проводилась стимуляция яичников, пункция яйцеклеток, оплодотворение и культивация эмбрионов.

Криоперенос или перенос замороженных эмбрионов – это перенос оттаянных, ранее замороженных эмбрионов в полость матки.

 

Как происходит заморозка эмбрионов

Для замораживания эмбрионов сейчас используется метод мгновенной заморозки — метод витрификации. Эмбрионы помещаются в среду для криоконсервации внутри специальных соломинок. Соломинки помещают в жидкий азот с температурой -196 С, там они замораживаются с огромной скоростью, исключая образование кристаллов льда. Такой способ криоконсервации не повреждает эмбрионы и сохраняет до 99% жизнеспособных эмбрионов.

Эмбрионы могут храниться неограниченное количество времени. Ультранизкие температуры позволяют полностью остановить все биохимические процессы внутри эмбриона и сохранить его в том состоянии, в котором он был заморожен. Например, в 2017 году из замороженного 25 лет назад эмбриона родился здоровый ребенок — и это не единственный такой случай.

Когда стоит замораживать эмбрионы?
  • оставшиеся после ЭКО эмбрионы;
  • при угрозе возникновения синдрома гиперстимуляции яичников;
  • если в программе ЭКО женщина заболевает гриппом или аденовирусной инфекцией;
  • снижена вероятность прикрепления эмбрионов в связи с недостаточной толщиной эндометрия;
  • в случае наличия онкозаболевания и назначения химиотерапии;

Криоконсервация эмбрионов имеет огромные преимущества: увеличивает частоту наступления беременности на цикл стимуляции яичников, одновременно уменьшая риск развития синдрома гиперстимуляции яичников,уменьшает нагрузки на организм (Barnhart, 2014).

Вероятность наступления беременности и родов

Состояние эндометрия при имплантации эмбриона играет не последнюю роль для наступления беременности. Во время стимуляции яичников женский организм получает огромные дозы фолликулостимулирующих гормонов, которые приводят к изменению параметров эндометрия, а так же могут привести к синдрому гиперстимуляции яичников.

В криопротоколе имплантация проходит более физиологично, так как отсутствует стимуляция овуляции и пункция яйцеклеток.

 

В мае этого года в «Human Reproduction» вышла работа, где ученые наблюдали 20 687 женщин, вступивших в протокол ЭКО. Исследователи изучали число успешных родов при использовании замороженных эмбрионов.

 

Исследование показало, что количество успешных родов при использовании стратегии замороженных эмбрионов составил 50.74%. Предыдущие исследования продемонстрировали, что показатель успешных родов у женщин, проходящих процедуру ЭКО в свежем цикле, составил 29,6 % (Smith et al., 2015; Neubourg et al., 2016) .

Таким образом, можно сделать вывод, что эффективность криопереноса не только не уступает, но и превосходит по показателям результаты переносов эмбрионов в свежем цикле. Поэтому, за счет почти в 2 раза большей эффективности криопереноса, небольшие дополнительные расходы на заморозку эмбрионов, могут обернуться существенной экономией за счет снижения числа необходимых для достижения беременности циклов ЭКО.

Остались вопросы?

Всю актуальную и подробную информацию по хранению и транспортировке эмбрионов вы можете получить, позвонив по телефону: +7 (499) 116-53-90 или записавшись на консультацию.

Отзывы | Клиника «Центр ЭКО» Симферополь

Здравствуйте, меня зовут Алексанра, мне 43 года. Я хочу рассказать историю своего везения. Я живу в Сергиевом-Посаде, это маленький подмосковный город. В Симферополе сейчас работает мой муж. Когда мы приняли решение пойти на ЭКО, предполагали делать это в Москве. Но вот первое везение: обмолвились с одним нашим здешним знакомым о наших планах и он посоветовал Симферопольскую клинику Центр ЭКО. Вернее, поставил нас перед фактом, что уже записал нас на прием.Так Москва поменялась на Симферополь. Нам сразу приглянулась домашняя, совершенно комфортная обстановка в клинике. Нас приняла доктор Светлана Валерьевна Мурунова,которая спокойно, доброжелательно, учитывая мой возраст и другие факторы, обрисовала наши перспективы, чем вселила некоторое спокойствие и уверенность.Ведь лучше знать все, чем пребывать в неведении, не правда ли? К моменту начала протокола она ушла в декрет, дай Бог ей всего самого наилучшего в этот важный период жизни! И вот нас передали Наталье Владимировне Фирсовой. Этот человек обладает необычайно светлой, в тоже время деятельной энергией,чувствуется и видно, как она спокойно уверена в том, что она делает, она не медлит, но и не суетится, она рассказывает обо всем происходящем, отвечает широко и понятно на все вопросы, с ней я почувствовала себя в руках настоящего Доктора…сейчас она вернулась в клинику в Смоленск, и это везение для Смоленска, но как же повезло мне, человеку, который по работе оказался в Симферополе в одно время с ней!!! Когда мы прощались, я сказала, вне зависимости, от того, что впереди, я счастлива, что встретила Вас!!! И это так. Опуская подробности, скажу, что все манипуляции прошли легко, опять же, в атмосфере и окружении доброжелательного, компетентного и человечного коллектива.Отдельное спасибо Татьяне Павловне за ее работу! Сегодня я должна была звонить в клинику после трех, узнать результат хгч, но девочки с рецепции позвонили сами с радостной для меня новостью! Я знаю, что впереди у меня долгий путь, но я очень рада, что попала именно к вам , в Центр ЭКО в Симферополе!

Документы | ЭКО Алмазова | Санкт-Петербург

Несколько советов для тех, кто планирует лечение в отделении ВРТ:

1. Если вы получили направление на ЭКО к нам и можете приехать на предварительный прием (по ОМС) перед началом лечения, то мы советуем так и сделать. На приеме вы сможете познакомиться с лечащим врачом, обсудить дату начала и ход лечения, проверить наличие необходимых анализов.

 

2. Обычно лечение бесплодия (ЭКО / ЭКО-ИКСИ или криопротокол) начинается на 2-3 день цикла. Напоминаем, что 1 день цикла — это 1 день ярких кровянистых выделений. Если вы точно знаете, когда этот момент наступит — рекомендуем записаться заранее на «вступление в цикл ЭКО или криопротокол» по телефону регистратуры +7 (812) 702-68-60 или через форму онлайн-записи. Если такой информации у вас нет, тогда нужно дождаться 1 дня цикла и записаться на прием любым из этих способов. Если 3-й день цикла приходится на понедельник, тогда мы вас примем без предварительной записи (но лучше все же уточнить время, позвонив в регистратуру в 9 утра). Если вы планируете проведение криопротокола и хотите приехать только на перенос эмбрионов, согласуйте ваши действия с лечащим врачом. Это можно сделать по телефону регистратуры или по электронной почте. Узнать, что вас ждет на первом приеме и в процессе лечения, можно, прочитав ответы на Часто Задаваемые Вопросы.

3. В памятках указаны документы, которые требуются для оформления медицинской документации. Пожалуйста, подготовьте их копии независимо от того, были ли вы у нас в центре ранее. Если вы проходите лечение за счет средств ОМС, то на каждый эпизод лечения мы оформляем новую карту. То же самое касается результатов анализов. Все анализы, которые указаны в памятках, должны быть вложены в вашу карту. Если вы не хотите отдавать нам оригиналы — заранее подготовьте их копии.

4. Обратите внимание на правила посещения медицинских учреждений во время эпидемии коронавируса. Перед выходом из дома оцените свое состояние. При повышении температуры тела выше 37 и/или появлении признаков ОРВИ – отмените визит в центр и обратитесь к врачу-терапевту. Посмотреть, как подготовиться к визиту в центр, можно здесь.

5. Помните, что на оформление медицинской документации (а сейчас — еще на измерение температуры и заполнение анкеты на входе) требуется время. Чтобы не задерживать прием и не создавать очереди, приходите к нам за 15-20 минут до назначенного визита.

6. Если у вас остались вопросы по предстоящему лечению, свяжитесь​ с нами любым удобным для вас способом (по телефону или через электронную почту). Мы постараемся ответить на все!

Отзывы — Remedi

Младова Елена Сергеевна

Свой отзыв о клинике Ремеди я хочу начать с выражением огромной благодарности всей команде за их дело! Попала в Ремеди по рекомендации известного деятеля в сфере материнства, рекомендовали обратиться к Младовой Елене Сергеевне, однако, в связи с тем, что у нас не было показаний к ЭКО, а клиника как раз направлена больше на это, мы записались к врачу акушеру гинекологу на стандартный осмотр с просьбой составить карту планирования наступления беременности естественным путем(то есть какие анализы необходимо сдать, узи и т.д.). Важно было обрисовать нам схему планирования, так как шестью месяцами ранее был печальный опыт с первой беременностью, которая замерла на ранних сроках, никто, к сожалению, не смог определить причину. Тогда, кстати говоря, наблюдалась в общем порядке в местной бесплатной ЖК и соответственно и «чистку» мне тоже сделали в условиях общего приемника по ОМС-(отсюда и незнание того, что же случилось, так как предложений исследовать плод не было, а мы и не знали, что так можно). Решив с супругом, что такие карусели нам не по душе- побежали в Ремеди, где попали в руки к нашему замечательному, заботливому, нежному, очень человечному и профессиональному врачу Марии Викторовне Селиховой. Через три месяца, после первого осмотра беременность наступила, сразу как узнали об этом- побежали сдавать необходимые анализы и приехали на осмотр. Все шло отлично и в 8 недель мы заключили контракт на ведение всего срока беременности, это значит, что ехать нам теперь надо будет часто, а это без малого, другой конец города, но ради того, чтобы ощущать себя в надежных руках-пойдёшь и не на такое. В общем вся моя беременность прошла как у Бога за пазухой, под чутким контролем Марии Викторовны. Все было спланировано по времени, никаких очередей, никаких конфликтов или недопонимания, обследования все проводились в клинике, нужные анализы+ Нипт сдавали тоже там, приятная обстановка, где тебя не спихивают или гоняют как Сидорову козу по очередям и т.д. Все приемы и узи были в присутствии супруга. Кабинет УЗИ супер сильный, Справцева Алла Игоревна эксперт от Бога, видит все абсолютно. Очень важно было находиться на связи с доктором, так как часто возникали вопросы, которые нужно было снять во избежании лишнего стресса и такая возможность была. Благодаря всем этим факторам в совокупности- беременность пролетела незаметно, я и не заметила, как на руках оказался мой ребёнок. Хочу отдельно выделить школу подготовки будущих родителей, которую также ведёт замечательная наша Мария Викторовна. Благодаря этой школе мы полностью подготовились к появлению малыша, купили все необходимое и главное- знали, что с малышом делать, как кормить, как купать и ухаживать за ним, а мы, на секундочку, никогда младенцев в руках не держали. Очень сильный врач психолог в Ремеди, Эстер Вавилонская, после встречи с ней,принять материнство стало чуточку проще, не так страшно . Подводя итоги, хочу сказать, что я всеми руками и от чистого сердца рекомендую данную клинику в качестве гаранта прекрасной Беременности, стабильной психики и в целом становления родителем. Спасибо огромное! Низкий поклон и так держать!

Ирина Журавлева

Отзывы о врачах и центре персонального здоровья и репродукции Генезис

Здравствуйте, я являлась пациенткой ЦР «Генезис» и хотела рассказать Вам свою счастливую историю. Когда мы с мужем обратились в центр «Генезис», мы уже ни на что не надеялись, поскольку 6 лет неудачных попыток стать родителями, оставили в нашем сознании свой отпечаток. В Генезис мы обратились по совету своих знакомых, которым уже с помощью специалистов Генезина посчастливилось стать родителями. Записываясь на бесплатную консультацию, я не знала к какому именно врачу попаду. Придя на консультацию, нас с мужем встретили приветливые сотрудники центра. Далее к нам вышла врач Лебедева Елена Александровна, которая сразу расположила меня к себе. Находясь в ее кабинете, я рассказала свою проблему. Выслушав меня, Елена Александровна придала мне уверенности и пообещала, что мы с мужем скоро станем счастливыми родителями. С этого и началось мое лечение в Генезисе. В тот же день мне были назначены необходимые анализы и процедуры, что меня очень удивило, поскольку за 6 лет хождения по различным клиникам, ничего кроме, как пустых слов и оплаченных консультаций, сделано не было . Примерно через 1,5 месяца, я вступила в протокол, который был очень длинный. В центр на прием к Елене Александровне я приходила через день, за это время Елена Александровна стала для меня родным человеком. После продолжительной стимуляции, были получены заветные клетки, которые в последствие были оплодотворены. Но в силу моего физического здоровья, осуществить перенос не получилось. Эмбриончики были заморожены. А день переноса был назначен только лишь через 2 месяца, однако, и его не состоялось. Я была совсем убита, но только Елена Александровна, ее профессионализм, настойчивость и уверенность убедили меня не сдаваться. И вот после месячного лечения и необходимых процедур мы с мужем вновь пришли в ЦР «Генезис», где осуществили процедуру ИКСИ. А через месяц я узнала, что беременная, нашего с мужем счастья не было предела! В настоящее время мы воспитываем дочь, ей уже почти 8 месяцев! Мы стали и являемся счастливыми родителями, как нам обещала Елена Александровна! Считаю, что благодаря таким специалистам и клиникам, люди могут обрести самое главное и заветное счастье в мире, стать родителями. СПАСИБО всем специалистам ЦР «Генезис», а главное Лебедевой Елене Александровне, за самое дорогое, что есть в моей жизни, за дочь! Советую всем, кто не можем, но хочет стать родителями, идти в Центр репродукции «Генезис», вам здесь обязательно помогут и найдут подход и лечение каждому пациенту, здесь вы найдете свое счастье! Спасибо!

Лечение женского и мужского бесплодия в клинике репродукции «Философия жизни»

Спустя 2,5 года безуспешных попыток забеременеть, благодаря группе на пермском форуме, я решила подать документы на ЭКО по ОМС (почему-то ни один врач нам о такой возможности не сказал). Нас поставили в очередь, и через полгода я получила квоту. К этому моменту я побывала во всех пермских клиниках, которые оказывают такую услугу, увидела и пообщалась с врачами, прочитала отзывы и рекомендации в интернете. Я понимала, что от врача-репродуктолога, который будет вести протокол ЭКО зависит 90% успеха (еще 9% — от эмбриолога и  1%-удача). Мне повезло — я нашла «своего врача», понимающего, искренне желающего помочь и готового отвечать на любые вопросы днем и ночью. Им стала Екатерина Сергеевна Козловская. С ней мы прошли через первый свежий протокол (ХГЧ <1), криопротокол (ХГЧ на 10 день 74, на 12-72 и на 14-40), и второй свежий протокол ЭКО по ОМС в ноябре 2018г. К нему мы тщательно подготовились: гистероскопия, рекомендации эндокринолога и гематолога. И  вот спустя 4 года нашего планирования,  результат был положительный!  В день рождения своего мужа — 7 декабря, я подарила ему листок с результатом ХГЧ 132!  Моя беременность протекала без каких-либо осложнений. А ведь я была готова и к токсикозу, и к обжорству, и к неприятию запахов,… Когда ТАК долго ждешь исполнения заветной мечты, то готова ради нее на все!

40 недель пролетели как на одном дыхании. 22 августа на свет появился наш долгожданный сыночек. К сожалению, роды были полной противоположностью беременности. После долгих мук схваток, прокола пузыря и потуг, у малыша начал падать пульс. И врачи решили экстренно сделать Кесарево. Сына спасли! Он родился с весом 3,45кг и ростом 53 см, абсолютно здоровым! Этот маленький комочек лежал у меня на груди, пока меня оперировали и согревал своим теплом. Тогда я наконец,осознала, что стала мамой! Заветная мечта сбылась! И этим счастьем я обязана своему врачу-репродуктологу — Екатерине Сергеевне. Хочу поблагодарить ее за все, что она сделала для исполнения моей мечты, но боюсь, что и 1000 благодарностей будет мало.

Огромное Вам спасибо за нашего сына!  

Cryoskin или CoolSculpting — что лучше?

Вы в хорошей форме, но беспокоитесь о неподатливых участках тела, которые, кажется, не меняются, независимо от того, сколько вы тренируетесь? Что ж, благодаря терапевтическому решению, известному как криотерапия, вам повезло! Эти две формы криотерапии, обычно применяемые с помощью техник Cryoskin и CoolSculpting, предлагают эффективные средства как для уменьшения появления жировых отложений, так и для тонизирования тела. Они делают это, используя холодную температуру для замораживания и, таким образом, уничтожения жировых клеток.Но что более эффективно и каковы принципиальные различия между этими двумя методами лечения? Читайте ниже, чтобы узнать все о процедурах Cryoskin и CoolSculpting.

Что такое Криокожа?

Первоначально разработанный во Франции криоскин — это общий термин для уничтожения жировых клеток путем концентрированного применения холода и тепла, процесс, известный как апоптоз (или «запрограммированная гибель клеток»). Лечение является неинвазивным, безболезненным и использует инструмент, похожий на палочку, для скольжения по целевым проблемным областям.Но на самом деле доступны три различных процедуры Cryoskin: CryoSlimming, CryoToning и Cryoskin для лица. Во всех трех процедурах используется по существу одна и та же технология, единственное различие заключается в настройках, на которые запрограммирована палочка.

Для начала, CryoSlimming фокусируется на одной конкретной области тела за раз и, как правило, лучше всего воздействует на живот, бедра, руки и спину. В стандартной процедуре CryoSlimming к проблемному участку прикладывают тепло при 40ºC в течение 2 минут, а затем 12 минут холода при -8ºC, и процедура обычно длится около 28 минут.Для достижения наилучших результатов рекомендуется от трех до пяти процедур на область с интервалом в две недели. Это рекомендуемый интервал из-за времени, которое требуется жировым клеткам для прохождения через лимфатическую систему, где они в конечном итоге вымываются из организма с мочой. Этот процесс также известен как криолиполиз.

Другой формой лечения Cryoskin является CryoToning, который действует путем охлаждения подкожного жира или слоя жира непосредственно под кожей. Когда жир охлаждается, кровеносные сосуды расширяются (расширение сосудов) и стимулируется выработка коллагена, разрушающего волокна, вызывающие целлюлитные ямочки.Более эффективный для подтяжки дряблой кожи и устранения признаков целлюлита, CryoToning также помогает уменьшить признаки старения. Процедура обычно длится 20 минут, для достижения наилучших результатов рекомендуется от трех до пяти процедур. Однако, в отличие от криопохудения, за один сеанс можно воздействовать на несколько областей.

Последней формой лечения Cryoskin является процедура Cryoskin для лица, и ее можно рассматривать как своего рода безоперационную подтяжку лица. Процедура, специально разработанная для подтяжки лица, шеи и подбородка, стимулирует выработку коллагена.Тонкие линии и морщины уменьшаются, текстура кожи улучшается, а размер пор и эластичность кожи увеличиваются. А еще лучше, нет никакого периода простоя после лечения. Для достижения наилучших результатов рекомендуется от трех до пяти процедур.

Все три вида лечения безопасны для всех, кроме пациентов с тяжелой формой синдрома Рейно, пациентов с плохим кровообращением, пациентов с тяжелой формой диабета, больных раком и беременных женщин. Но следует сказать, что Cryoskin не является средством для похудения. Лучше всего подходит для тех, кто в хорошей форме, кто хочет тонко похудеть, привести в тонус и устранить проблемные зоны на своем теле.Иными словами, Cryoskin не должен заменять диету и физические упражнения.

Что такое CoolSculpting?

CoolSculpting, запатентованная нехирургическая техника охлаждения, используемая для уменьшения жира в отдельных областях, также основана на вышеупомянутой науке о криолиполизе. Лучше всего он работает на внутренней и внешней поверхности бедер, верхней и нижней части живота, ладонях, руках, подбородке, спине и под ягодицами. Также было показано, что он уменьшает проявления целлюлита на руках, ягодицах и ногах.Одобренная FDA в 2012 году, это неинвазивная процедура, которая не требует анестезии, игл или надрезов и обычно длится от одного до трех часов.

Итак, как работает процедура CoolSculpting? Обученный медицинский работник будет использовать специально разработанное портативное устройство для лечения целевых областей. Применяется гелевая подушечка и аппликатор, и контролируемое охлаждение доставляется к целевому жиру. В отличие от палочки Cryoskin, устройство остается неподвижным на протяжении всей процедуры. Хотя в целом боль минимальна, во время процедуры могут возникать ощущения покалывания, жжения, пощипывания, стягивания, боли или спазмов.Время восстановления минимально, и нормальная деятельность может возобновиться сразу после процедуры. Лучше всего то, что после процедуры CoolSculpting в обработанной области наблюдается уменьшение жира на 20-80%, хотя эти результаты могут быть незаметны в течение трех недель.

Некоторые временные побочные эффекты после лечения включают отек, кровоподтеки, покраснение, боль, спазмы и болезненность в обработанной области. Как и Cryoskin, CoolSculpting — это не решение для похудения, а эффективное средство устранения выпуклостей тела у тех, кто уже имеет близкий к идеальному вес.Не рекомендуется пациентам с болезнью Рейно в анамнезе, лицам с выраженной чувствительностью к низким температурам или лицам с криоглобулинемией, болезнью холодовых агглютининов и пароксизмальной холодовой гемоглобуинурией (ПКГ).

Cryoskin vs Coolsculpting: что выбрать?

Поскольку и Cryoskin, и Coolsculpting одинаково эффективны, основное различие между ними заключается в стоимости, эффективности и методе. Процедуры CryoSlimming, CryoToning и Cryoskin для лица намного короче, чем CoolSculpting (20-30 минут против 30 минут).от одного до трех часов), но для достижения наилучших результатов требуется от трех до пяти сеансов.

CoolSculpting, с другой стороны, требует только одной процедуры. Но с этим приходит, пожалуй, самое важное различие между двумя процедурами: стоимость. Поскольку цена процедуры CoolSculpting зависит от ряда переменных, включая размер обрабатываемой области, размер аппликатора и желаемый результат, стоимость обычно колеблется от 2000 до 4000 долларов. Cryoskin значительно дешевле: цены обычно составляют 350 долларов за сеанс, 975 долларов за пакеты из трех сеансов и 1500 долларов за пакеты из пяти сеансов.Таким образом, по цене Cryoskin является лучшим выбором.

Какой бы метод вы ни выбрали, вы можете быть уверены, что получите безопасное и эффективное решение для похудения. Просто помните, что процедуры Cryoskin и CoolSculpting ни в коем случае не должны заменять традиционную диету, физические упражнения и здоровый образ жизни. Свяжитесь с квалифицированным клиницистом и узнайте больше о том, как получить тело, о котором вы всегда мечтали, уже сегодня!

 

Замораживание жира (криолиполиз)

Обзор

Что такое криолиполиз?

Криолиполиз, обычно называемый замораживанием жира, представляет собой нехирургическую процедуру уменьшения жира, при которой используется холодная температура для уменьшения жировых отложений в определенных областях тела.Процедура предназначена для уменьшения локализованных жировых отложений или выпуклостей, которые не реагируют на диету и физические упражнения. Он не предназначен для людей, страдающих ожирением или со значительным избыточным весом. Техника запатентована под названием CoolSculpting™.

Какие участки тела лучше всего подходят для криолиполиза?

Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов одобрило криолиполиз для лечения жировых отложений под подбородком, плечами, внутренней и внешней поверхностью бедер, живота, бедер/боков («ручки любви»), верхней части спины («валики бюстгальтера»), нижней части спины и под ягодицами.

Детали процедуры

Как проводится криолиполиз?

Процедуру можно провести в кабинете врача или поликлинике. Оцениваются размер и форма жировых отложений, а область, подлежащая лечению, обводится карандашом для маркировки кожи. Пациенты бодрствуют во время процедуры.

Ручное устройство, называемое аппликатором, используется для замораживания слоя жировых клеток (адипоцитов) под кожей. Сначала на область наносится гелевая подушечка для защиты кожи.Затем жировая выпуклость отсасывается или вакуумируется в отверстие аппликатора. Вы почувствуете тянущее или тянущее ощущение при всасывании. Эти ощущения, сильный холод плюс другие возможные ощущения — покалывание, покалывание, боль, судороги — уменьшаются через 5–10 минут, так как в процессе охлаждения область немеет. Жировой слой постепенно охлаждают до заданной температуры от 30,2 до 39,2 градусов по Фаренгейту.

Обработка области занимает до одного часа.После обработки области аппликатор удаляют. Область можно массировать в течение 2-3 минут, чтобы помочь расщеплению жировых клеток.

Как разрушаются жировые клетки?

Этот метод основан на открытии, что жировые клетки более восприимчивы к повреждению от холода, чем другие клетки, такие как клетки кожи. Холодная температура повреждает жировые клетки. Травма вызывает воспалительную реакцию организма, что приводит к гибели жировых клеток. Макрофаги, тип лейкоцитов и часть иммунной системы организма, «призываются к месту травмы», чтобы удалить мертвые жировые клетки и мусор из организма.

Сколько локализованного жира можно потерять с помощью криолиполиза и когда я начну замечать результаты?

Исследования показали среднее уменьшение жира на 15-28 процентов примерно через 4 месяца после первоначального лечения. Однако вы можете начать замечать изменения уже через 3 недели после лечения. Значительное улучшение отмечается примерно через 2 месяца.

Риски/выгоды

Каковы преимущества криолиполиза?

У криолиполиза много преимуществ:

  • Хирургический разрез не требуется.
  • Это процедура с низким риском. Нет риска заражения.
  • Процедура может проводиться амбулаторно.
  • Перед проведением процедуры пациенты не нуждаются в седативных средствах или анестезии.
  • За один сеанс можно обрабатывать более одной области тела.
  • Большинство людей могут возобновить свою обычную повседневную деятельность сразу после лечения.
  • Процедуру можно проводить людям всех возрастов.
  • Нет повреждения нервных волокон, кровеносных сосудов, мышц или длительного повреждения кожи в зоне обработки.
  • Поврежденные или разрушенные жировые клетки навсегда удаляются из организма.
  • У пациентов может повыситься самооценка из-за улучшения внешности.

Каковы недостатки криолиполиза?

К недостаткам криолиполиза относятся:

  • Процедура рекомендуется только людям с хорошим общим состоянием здоровья, без неврологических или ортопедических проблем, которые хотят «точечного» уменьшения жира в определенных областях тела.Криолиполиз не рекомендуется людям со значительным избыточным весом или ожирением.
  • Существует риск того, что поверхность кожи может стать неровной/не гладкой после заживления.
  • Для достижения желаемых результатов может потребоваться более одного сеанса.
  • Если требуется более одного сеанса лечения, следующий сеанс можно проводить только через 6–8 недель после первого сеанса. Это связано с тем, что удаление поврежденных жировых клеток из организма может занять много времени.
  • Результаты проявляются не сразу. Поскольку жировые клетки удаляются из организма постепенно, для достижения оптимальных результатов может потребоваться от 3 до 6 месяцев.
  • Одним из редких побочных эффектов, который может возникнуть, является парадоксальная жировая гиперплазия. В этом редком состоянии размер жировых клеток увеличивается после криолиполиза. Мужчины и люди латиноамериканского происхождения чаще испытывают это.
  • После криолиполиза возможно увеличение веса. Жир может откладываться в других частях тела.

Есть ли люди, которым не рекомендуется криолиполиз?

Криолиполиз не следует проводить пациентам с ожирением или значительным избыточным весом. Также ее нельзя проводить на участках кожи с порезами или травмами, на участках с выраженным варикозным расширением вен, дерматитом или другими кожными поражениями.

Люди с аномальной чувствительностью к холоду или непереносимостью холода не подходят. Процедура не рекомендуется людям со следующими заболеваниями:

  • Феномен Рейно . Редкое состояние, при котором низкие температуры могут препятствовать притоку крови к пальцам рук и ног.
  • Криоглобулинемия . Тип васкулита (воспаление кровеносных сосудов), вызванный аномальными белками, которые становятся твердыми или гелеобразными при низких температурах. Это связано с закупоркой кровеносных сосудов и другими проблемами.
  • Пароксизмальная холодовая гемоглобинурия. Очень редкое аутоиммунное заболевание, при котором эритроциты повреждаются при воздействии холода.
  • Простуда Крапивница . Редкое состояние, при котором на коже появляются красные зудящие пятна (крапивница) после воздействия низких температур.
  • Болезнь холодовых агглютининов. Редкий тип аутоиммунной гемолитической анемии, при котором иммунная система организма ошибочно атакует и разрушает собственные эритроциты. Состояние часто провоцируется или усугубляется низкими температурами.

Другие условия, представляющие риск, включают

Восстановление и перспективы

Какие побочные эффекты следует ожидать сразу после криолиполиза?

Временные побочные эффекты для обрабатываемых областей могут включать:

  • Боль или боли
  • Жжение или покалывание кожи
  • Покраснение
  • Отек
  • Изменение цвета кожи или кровоподтеки
  • Кожная чувствительность или онемение

Побочные эффекты могут сохраняться от нескольких дней до нескольких недель после лечения.Ваш врач может порекомендовать вам принять обезболивающее, чтобы облегчить боль или другой дискомфорт.

Сколько сеансов криолиполиза обычно требуется?

У вас может быть только одна проблемная зона, для которой может потребоваться только один сеанс лечения. У вас может быть более одной проблемной области, которая может потребовать лечения, или может потребоваться более одного лечения в определенной области для достижения желаемой цели. Вы будете работать со своим врачом, чтобы разработать план и количество сеансов лечения, которые наилучшим образом соответствуют вашим желаемым целям.

дополнительные детали

Сколько стоит криолиполиз?

Общая стоимость будет зависеть от того, каких целей вы хотите достичь. В среднем стоимость типичного плана лечения колеблется от 2000 до 4000 долларов.

Покроет ли моя страховка стоимость криолиполиза?

Страховка обычно не покрывает стоимость плановых косметических операций и процедур.

Каковы другие соображения или опасения по поводу криолиполиза?

Процедура должна выполняться только пластическим хирургом, косметическим хирургом или другим лицензированным специалистом по уходу за кожей.Поговорите со своим врачом, если у вас есть какие-либо опасения, прежде чем пройти процедуру.

Сравнение свежекультивированных и свежеразмороженных (криоконсервированных) мезенхимальных стволовых клеток в доклинических моделях воспаления in vivo: протокол доклинического систематического обзора и метаанализа | Систематические обзоры

  • Thomas ED, Lochte HL Jr, Lu WC, Ferrebee JW. Внутривенное вливание костного мозга у больных, получающих лучевую и химиотерапию. Медицинский журнал Новой Англии.1957; 257: 491–6.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Von Bahr L, Batsis I, Moll G, Hagg M, Szakos A, Sundberg B, Uzunel M, Ringden O, Le Blanc K. Анализ тканей после терапии мезенхимальными стромальными клетками у людей указывает на ограниченное долгосрочное приживление и отсутствие образования эктопической ткани. Стволовые клетки. 2012;30(7):1575–8.

    Артикул Google ученый

  • Варфоломей А., Стерджен С., Сиацкас М., Феррер К., Макинтош К., Патил С., Харди В., Дивайн С., Укер Д., Динс Р., Мозли А., Хоффман Р.Мезенхимальные стволовые клетки подавляют пролиферацию лимфоцитов in vitro и продлевают выживаемость кожного трансплантата in vivo. эксп Гематол. 2002;30(1):42–8.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Ди Никола М., Карло-Стелла С., Магни М., Миланези М., Лонгони П.Д., Маттеуччи П., Гризанти С., Джанни А.М. Стромальные клетки костного мозга человека подавляют пролиферацию Т-лимфоцитов, индуцированную клеточными или неспецифическими митогенными стимулами. Кровь. 2002;99(10):3838–43.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Le Blanc K, Tammik L, Sundberg B, Haynesworth SE, Ringden O. Мезенхимальные стволовые клетки ингибируют и стимулируют смешанные культуры лимфоцитов и митогенные ответы независимо от главного комплекса гистосовместимости. Сканд Дж. Иммунол. 2003;57(1):11–20.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Ле Блан К., Расмуссон И., Сандберг Б., Готерстром К., Хассан М., Узунел М., Рингден О.Лечение тяжелой острой реакции «трансплантат против хозяина» гаплоидентичными мезенхимальными стволовыми клетками сторонних производителей. Ланцет. 2004;363(9419):1439–41.

    Артикул Google ученый

  • Nauta AJ, Fibbe WE. Иммуномодулирующие свойства мезенхимальных стромальных клеток. Кровь. 2007;110(10):3499–506.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Уччелли А., Моретта Л., Пистойя В.Мезенхимальные стволовые клетки в норме и при патологии. Нат Рев Иммунол. 2008;8(9):726–36.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Готерстром С., Рингден О., Таммик С., Зеттерберг Э., Вестгрен М., Ле Бланк К. Иммунологические свойства мезенхимальных стволовых клеток плода человека. Am J Obstet Gynecol. 2004;190(1):239–45.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Chang CJ, Yen ML, Chen YC, Chien CC, Huang HI, Bai CH, Yen BL.Плацентарные мультипотентные клетки проявляют иммунодепрессивные свойства, которые усиливаются в присутствии гамма-интерферона. Стволовые клетки. 2006;24(11):2466–77.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Griffin MD, Elliman SJ, Cahill E, English K, Ceredig R, Ritter T. Краткий обзор: терапия мезенхимальными стромальными клетками взрослых при воспалительных заболеваниях: насколько хорошо мы соединяем точки? Стволовые клетки. 2013;31(10):2033–41.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Конник П., Колаппан М., Патани Р., Скотт М.А., Кроули С., Он С.Л., Ричардсон К., Барбер К., Уэббер Д.Дж., Уилер-Кингшотт К.А., Тозер Д.Дж., Самсон Р.С., Томас Д.Л., Ду М.К., Луан С.Л. , Michell AW, Altmann DR, Thompson AJ, Miller DH, Compston A, Chandran S. Протокол исследования мезенхимальных стволовых клеток при рассеянном склерозе (MSCIMS) и исходные когортные характеристики: открытый предварительный тест: посттестовое исследование со слепым методом оценки результатов.Испытания. 2011;12:62.

    ПабМед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Baron F, Lechanteur C, Willems E, Bruck F, Baudoux E, Seidel L, Vanbellinghen JF, Hafraoui K, Lejeune M, Gothot A, Fillet G, Beguin Y. Котрансплантация мезенхимальных стволовых клеток может предотвратить смерть от трансплантата Болезнь против хозяина (РТПХ) без отмены эффектов «трансплантат против опухоли» после аллогенной трансплантации с несовпадением HLA после немиелоаблативного кондиционирования.Трансплантация костного мозга Биол. 2010;16(6):838–47.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Интрона М., Луккини Г., Дандер Э., Галимберти С., Ровелли А., Бальдуцци А., Лонгони Д., Паван Ф., Маскиокки Ф., Альгаротти А., Мико К., Грасси А., Деола С., Каваттони И., Гайпа Г., Белотти D, Персегин П., Парма М., Полиани Э., Голай Дж., Педрини О., Капелли С., Кортелаццо С., Д’Амико Г., Бионди А., Рамбальди А., Биаджи Э. Лечение реакции «трансплантат против хозяина» с помощью мезенхимальных стромальных клеток: фаза Я изучаю 40 взрослых и детей.Трансплантация костного мозга Биол. 2014;20(3):375–81.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Перес-Симон Х.А., Лопес-Вильяр О., Андреу Э.Дж., Рифон Х., Мунтион С., Диес К.М., Санчес-Гуихо Ф.М., Мартинес К., Валькарсель Д., Канизо К.Д. Мезенхимальные стволовые клетки, размноженные in vitro с помощью человеческой сыворотки, для лечения острой и хронической реакции «трансплантат против хозяина»: результаты клинических испытаний фазы I/II. Гематология. 2011;96(7):1072–1076.

    ПабМед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Эмадин М., Горбани Л.М., Фазели Р., Мохсени Ф., Могадасали Р., Мардпур С., Хоссейни С.Е., Никнеджади М., Мойниния Ф., Агахосейн Ф.А., Багбан Э.Р., Восуг Д.А., Лабибзаде Н., Миразими Б.А., Бахарванд Х., Агдами Н.Долгосрочное наблюдение внутрисуставных инъекций аутологичных мезенхимальных стволовых клеток у пациентов с остеоартритом коленного, голеностопного или тазобедренного суставов. Арх Иран Мед. 2015;18(6):336–44.

    ПабМед Google ученый

  • Джо Ч., Ли Ю.Г., Шин В.Х., Ким Х., Чай Дж.В., Чон Э.К., Ким Ч.Е., Шим Х., Шин Д.С., Шин И.С., Ра Д.С., О С., Юн К.С. Внутрисуставная инъекция мезенхимальных стволовых клеток для лечения остеоартрита коленного сустава: клиническое испытание, подтверждающее концепцию.Стволовые клетки. 2014;32(5):1254–66.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Orozco L, Munar A, Soler R, Alberca M, Soler F, Huguet M, Sentis J, Sanchez A, Garcia-Sancho J. Лечение остеоартрита коленного сустава аутологичными мезенхимальными стволовыми клетками: результаты 2-летнего наблюдения . Трансплантация. 2014;97(11):e66–8.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Вега А., Мартин-Ферреро М.А., Дель Канто Ф., Альберка М., Гарсия В., Мунар А., Ороско Л., Солер Р., Фуэртес Дж.Дж., Уге М., Санчес А., Гарсия-Санчо Х.Лечение остеоартрита коленного сустава аллогенными мезенхимальными стволовыми клетками костного мозга: рандомизированное контролируемое исследование. Трансплантация. 2015;99(8):1681–90.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Вивес Дж., Оливер-Вила I, Пла А. Соблюдение требований к качеству при переходе от трансплантации клеток к клеточной терапии в нефармацевтических условиях. Цитотерапия. 2015;17(8):1009–14.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Forbes GM, Sturm MJ, Leong RW, Sparrow MP, Segarajasingam D, Cummins AG, Phillips M, Herrmann RP.Исследование фазы 2 аллогенных мезенхимальных стромальных клеток при люминальной болезни Крона, рефрактерной к биологической терапии. Клин Гастроэнтерол Гепатол. 2014;12(1):64–71.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Молендейк И., Бонсинг Б.А., Рулофс Х., Петерс К.С., Вассер М.Н., Дейкстра Г., ван дер Воуде С.Дж., Дуйвестейн М., Венендал Р.А., Звагинга Дж.Дж., Верспагет Х.В., Фиббе В.Е., ван дер Меулен-де Йонг А.Е., Хомс ДВ. Мезенхимальные стромальные клетки аллогенного костного мозга способствуют заживлению рефрактерных перианальных свищей у пациентов с болезнью Крона.Гастроэнтерология. 2015;149(4):918–27 e916.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Чанг Ю.С., Ан С.И., Ю Х.С., Сун С.И., Чхве С.Дж., О В.И., Пак В.С. Мезенхимальные стволовые клетки при бронхолегочной дисплазии: клиническое исследование фазы 1 с повышением дозы. J Педиатр. 2014;164(5):966–72 e966.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Вайс Д.Дж., Касабури Р., Фланнери Р., Леру-Уильямс М., Ташкин Д.П.Плацебо-контролируемое рандомизированное исследование мезенхимальных стволовых клеток при ХОБЛ. Грудь. 2013;143(6):1590–8.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Уилсон Дж.Г., Лю К.Д., Чжо Х., Кабальеро Л., Макмиллан М., Фанг Х., Косгроув К., Войник Р., Калфи К.С., Ли Дж.В., Роджерс А.Дж., Левитт Дж., Винер-Крониш Дж., Баджва Е.К., Ливитт А. , Маккенна Д., Томпсон Б.Т., Маттей М.А. Мезенхимальные стволовые (стромальные) клетки для лечения ОРДС: клиническое испытание фазы 1.Ланцет Респир Мед. 2015;3(1):24–32.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Макинтайр Л.А., Стюарт Д.Дж., Мей Ш.Дж., Кортман Д., Уотпул И., Грантон Дж., Маршалл Дж., Дос Сантос С., Уолли К.Р., Уинстон Б.В., Шлоссер К., Фергюссон Д.А., Канадская группа по испытаниям в области интенсивной терапии; Канадская группа трансляционной биологии интенсивной терапии. Клеточная иммунотерапия септического шока. I фаза клинических испытаний. Am J Respir Crit Care Med. 2018;197(3):337–47.https://doi.org/10.1164/rccm.201705-1006OC.

    КАС Статья Google ученый

  • Francois M, Copland IB, Yuan S, Romieu-Mourez R, Waller EK, Galipeau J. Криоконсервированные мезенхимальные стромальные клетки проявляют ослабленные иммунодепрессивные свойства в результате реакции теплового шока и нарушенного лицензирования гамма-интерферона. Цитотерапия. 2012;14(2):147–52.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Moll G, Alm JJ, Davies LC, et al.Обладают ли криоконсервированные мезенхимальные стромальные клетки нарушением иммуномодулирующих и терапевтических свойств? Стволовые клетки. 2014;32(9):2430–42.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Девани Дж., Хори С., Мастерсон С. и др. Мезенхимальные стромальные клетки человека уменьшают тяжесть острого повреждения легких, вызванного кишечной палочкой у крыс. грудная клетка. 2015;70(7):625–35.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Грамлич О.В., Буранд А.Дж., Браун А.Дж., Дойч Р.Дж., Кюн М.Х., Анкрум Дж.А.Криоконсервированные мезенхимальные стромальные клетки сохраняют свою активность в модели ишемии/реперфузии сетчатки: к готовой терапии. Научный доклад 2016; 6: 26463.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Круз Ф.Ф., Борг З.Д., Гудвин М. и др. Свежеразмороженные и непрерывно культивируемые мезенхимальные стромальные клетки костного мозга человека сравнительно уменьшают аллергическое воспаление дыхательных путей у иммунокомпетентных мышей.Стволовые клетки Transl Med. 2015;4(6):615–24.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Luetzkendorf J, Nerger K, Hering J, et al. Криоконсервация не изменяет основных характеристик мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток человека, пригодных для производства, включая иммуномодулирующий потенциал и отсутствие злокачественной трансформации. Цитотерапия. 2015;17(2):186–98.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Хиггинс JPT, Грин С.Кокрановский справочник по систематическим обзорам вмешательств, версия 5.1.0 [обновлено в марте 2011 г.]. Кокрановское сотрудничество; 2011 [цитировано 25 сентября 2018 г.]. Доступно на: www.handbook.cochrane.org.

    Google ученый

  • Мохер Д., Либерати А., Тецлафф Дж., Альтман Д., группа П. Предпочтительные элементы отчетности для систематических обзоров и метаанализов: отчет PRISMA. ПЛОС Мед. 2008;6(7). https://doi.org/10.1371/journal.pmed.1000097.

  • Мэй С.Х., Хайтсма Дж.Дж., Дос Сантос К.С., Дэн Ю., Лай П.Ф., Слуцкий А.С. и др.Мезенхимальные стволовые клетки уменьшают воспаление, усиливая бактериальный клиренс и улучшая выживаемость при сепсисе. Am J Respir Crit Care Med. 2010; 182:1047–57.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • душ Сантос К.С., Мурти С., Ху П., Шан И., Хайтсма Дж.Дж., Мей С.Х. и др. Сетевой анализ транскрипционных ответов, вызванных лечением мезенхимальными стволовыми клетками экспериментального сепсиса. Ам Джей Патол. 2012; 181:1681–92.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Гонсалес-Рей Э., Андерсон П., Гонсалес М.А., Рико Л., Бюшер Д., Дельгадо М.Стволовые клетки взрослого человека, полученные из жировой ткани, защищают от экспериментального колита и сепсиса. Кишка. 2009; 58: 929–39.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Либби П. Воспалительные механизмы: молекулярная основа воспаления и болезни. Нутр Рев. 2008;65. https://doi.org/10.1111/j.1753-4887.2007.tb00352.x.

  • Галипо Дж. Дилемма мезенхимальных стромальных клеток — является ли отрицательное исследование фазы III случайных донорских мезенхимальных стромальных клеток при стероидорезистентной реакции «трансплантат против хозяина» похоронным звоном или ударом по дороге? Цитотерапия.2013;15(1):2–8.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Галипо Дж. и др. Взгляд Международного общества клеточной терапии на иммунофункциональные анализы мезенхимальных стромальных клеток в качестве критерия высвобождения активности для клинических испытаний продвинутой фазы. Цитотерапия. 2016;2(18):151–9. https://doi.org/10.1016/j.jcyt.2015.11.008.

    КАС Статья Google ученый

  • Hooijmans CR, et al.Инструмент риска систематической ошибки SYRCLE для исследований на животных. БМС Мед Рез Методол. 2014;14:1. https://doi.org/10.1186/1471-2288-14-43.

    Артикул Google ученый

  • Эльшафай А., Омран Э.С., Абдельхалек М. и др. Качество отчетности в систематических обзорах исследований in vitro: систематический обзор. Curr Med Res Opin. 2019;35(9):1631–41. https://doi.org/10.1080/03007995.2019.1607270.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Хиггинс Джулиан П.Т., Альтман Дуглас Г., Гётше Питер С., Питер Дж., Дэвид М., Оксман Эндрю Д. и др.Инструмент Кокрановского сотрудничества для оценки риска систематической ошибки в рандомизированных исследованиях. БМЖ. 2011;343:d5928.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Саркис-Онофре Р. и др. Роль полимерного цемента в прочности сцепления штифтов из стекловолокна, зафиксированных в корневых каналах: систематический обзор и метаанализ исследований in vitro. Опер Дент. 2014;39(1). https://doi.org/10.2341/13-070-лит.

  • Гольбах Л.А., и др.Гомеостаз кальция и воздействие низкочастотных магнитных и электрических полей: систематический обзор и метаанализ исследований in vitro. Окружающая среда Интерн. 2016;92-93:695–706. https://doi.org/10.1016/j.envint.2016.01.014.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Фридрих Дж. О., Адхикари Н. К., Бейен Дж. Метод отношения средних как альтернатива разнице средних для анализа непрерывных переменных результатов в метаанализе: имитационное исследование.БМС Мед Рез Методол. 2008; 8:32. https://doi.org/10.1186/1471-2288-8-32.

    ПабМед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Морозильные камеры | Thermo Fisher Scientific

    Клеточные линии в непрерывном культивировании, вероятно, будут страдать от нежелательных последствий, таких как генетический дрейф, старение и микробное заражение, и даже в лучших лабораториях может произойти отказ оборудования. Установленная клеточная линия является ценным ресурсом, и ее замена требует больших затрат времени и средств.Поэтому жизненно важно, чтобы они были заморожены и сохранены для длительного хранения. Правильно хранящийся запас замороженных клеток является важной частью клеточной культуры.

    Как только в результате субкультивирования становится доступным небольшой излишек клеток, лучшим методом консервации является хранение их в замороженном виде в виде посевного материала , защищенного и не доступного для общего лабораторного использования. Рабочие запасы можно приготовить и пополнить из замороженных запасов семян. Если запасы семян истощаются, то криоконсервированные рабочие запасы могут служить источником для приготовления свежего посевного материала с минимальным увеличением числа генераций по сравнению с первоначальным замораживанием.

    Общий метод замораживания одинаков для прикрепившихся и суспензионных клеток, за исключением того, что прилипшие клетки необходимо удалить из культуральных чашек перед началом процедуры замораживания. Лучшим методом криоконсервации культивируемых клеток является их хранение в жидком азоте в полной среде в присутствии криозащитного агента, такого как диметилсульфоксид (ДМСО). Криопротекторы снижают температуру замерзания среды и обеспечивают более низкую скорость охлаждения, что значительно снижает риск образования кристаллов льда, которые могут повредить клетки и вызвать их гибель.

    Примечание: Известно, что раствор ДМСО облегчает процесс проникновения органических молекул в ткани. Обращайтесь с реагентами, содержащими ДМСО, используя оборудование и методы, соответствующие опасностям, создаваемым такими материалами. Утилизируйте реагенты в соответствии с местным законодательством.

    Среда для замораживания
    Всегда используйте рекомендуемую среду для замораживания для криоконсервации клеток. Среда для замораживания должна содержать криозащитный агент, такой как ДМСО или глицерин.Вы также можете использовать специальную среду для полной криоконсервации, такую ​​как среда для замораживания клеточных культур Gibco Recovery или среда для криоконсервации Gibco Synth-a-Freeze.

    • Среда для замораживания клеточных культур для восстановления представляет собой готовую к использованию полную среду для криоконсервации клеточных культур млекопитающих, содержащую оптимизированное соотношение эмбриональной бычьей сыворотки и бычьей сыворотки для повышения жизнеспособности клеток и их восстановления после оттаивания.
    • Среда для криоконсервации Synth-a-Freeze представляет собой стерильную среду для криоконсервации, не содержащую белков, с определенным химическим составом, содержащую 10 % ДМСО, подходящую для криоконсервации многих типов стволовых и первичных клеток, за исключением меланоцитов.
    • Сосуды для культивирования, содержащие культивируемые клетки в логарифмической фазе роста
    • Полная среда для выращивания
    • Криозащитный агент, такой как ДМСО (используйте бутыль, отведенную для культивирования клеток; открывайте только в ламинарном боксе) или морозильная среда, такая как в качестве среды для криоконсервации Synth-a-Freeze или среды для замораживания восстановительных клеточных культур
    • Одноразовые стерильные конические пробирки на 15 или 50 мл
    • Реагенты и оборудование для определения количества жизнеспособных и общих клеток (например,например, автоматический счетчик клеток Invitrogen Countess II FL или гемоцитометр, счетчик клеток и трипановый синий)
    • Стерильные криогенные флаконы для хранения (например, криопробирки)
    • Устройство для замораживания с регулируемой скоростью или изопропаноловая камера
    • Контейнер для хранения жидкого азота

    Для замораживания прикрепленных клеток, в дополнение к вышеуказанным материалам, вам потребуются:

    • Сбалансированный солевой раствор, такой как фосфатно-солевой буфер Gibco Dulbecco (DPBS), не содержащий кальция, магния или фенолового красного
    • Реагент для диссоциации, такой как Как Trypsin или Gibco Tryple Express, без фенола красный

    14115400054014415400054150

    12604013,15250061, AMQAF1000, AMQAX1000, 12648010, R00550

    Следующий протокол описывает общую процедуру для криоресирования культурных клеток. Для получения подробных протоколов всегда обращайтесь к вкладышу продукта для конкретной ячейки.

    1. Приготовьте среду для замораживания и храните при температуре от 2° до 8°C до использования. Обратите внимание, что подходящая среда для замораживания зависит от клеточной линии.
    2. В случае прилипших клеток осторожно отделите клетки от сосуда для тканевых культур, следуя процедуре, используемой во время пересева. Ресуспензируйте клетки в полной среде, необходимой для этого типа клеток.
    3. Определите общее количество клеток и процент жизнеспособности с помощью гемоцитометра, счетчика клеток и исключения трипанового синего или автоматического счетчика клеток Countess.В зависимости от желаемой плотности жизнеспособных клеток рассчитайте необходимый объем среды для замораживания.
    4. Центрифугируйте клеточную суспензию примерно при 100–200 g в течение 5–10 минут. Асептически декантируйте супернатант, не нарушая клеточный осадок.

      Примечание:   Скорость и продолжительность центрифугирования зависят от типа клеток.

    5. Ресуспендируйте клеточный осадок в среде для замораживания при температуре, рекомендованной для жизнеспособных клеток для определенного типа клеток.
    6. Распределите аликвоты клеточной суспензии в криогенные пробирки для хранения. Когда вы делите их на аликвоты, часто и осторожно перемешивайте клетки, чтобы поддерживать гомогенную клеточную суспензию.
    7. Заморозьте клетки в аппарате для замораживания с регулируемой скоростью, снижая температуру примерно на 1°C в минуту. В качестве альтернативы поместите криопробирки с клетками в камеру с изопропанолом и храните их при температуре –80°C в течение ночи.
    8. Перенесите замороженные клетки в жидкий азот и храните их в газовой фазе над жидким азотом.

    Следование приведенным ниже рекомендациям необходимо для криоконсервации клеточных линий для использования в будущем. Как и в случае с другими процедурами культивирования клеток, для достижения наилучших результатов мы рекомендуем строго следовать инструкциям, прилагаемым к вашей клеточной линии.

    • Замораживайте образцы культивируемых клеток в высокой концентрации и с как можно меньшим числом пассажей. Перед замораживанием убедитесь, что клетки жизнеспособны не менее чем на 90%. Обратите внимание, что оптимальные условия замораживания зависят от используемой клеточной линии.
    • Медленно замораживайте клетки, снижая температуру примерно на 1°C в минуту, используя криоморозильник с регулируемой скоростью или контейнер для криоморозильного замораживания, такой как «Mr. Frosty», доступный в лабораторном оборудовании Thermo Scientific Nalgene (Nalge Nunc).
    • Всегда используйте рекомендованную замораживающую среду. Среда для замораживания должна содержать криозащитный агент, такой как ДМСО или глицерин (см. Что такое пересев? ).
    • Образцы клеток следует хранить в паровой фазе жидкого азота при температуре ниже –135°C.
    • Всегда используйте стерильные криопробирки для хранения замороженных клеток. Криопробирки с замороженными клетками можно хранить погруженными в жидкий азот или в газовую фазу над жидким азотом (см. Примечание по технике безопасности ниже).
    • Всегда используйте средства индивидуальной защиты.
    • Все растворы и оборудование, контактирующие с клетками, должны быть стерильными. Всегда используйте надлежащую стерильную технику и работайте в ламинарном боксе.

    Примечание по безопасности: Биологически опасные материалы должны храниться в газовой фазе над жидким азотом.Хранение закрытых криопробирок в газовой фазе исключает риск взрыва. Если вы используете хранение в жидкой фазе, помните об опасности взрыва как стеклянных, так и пластиковых криопробирок и всегда надевайте защитную маску или защитные очки.

    Криотерапия рака предстательной железы – клиника Майо

    Обзор

    Криотерапия рака предстательной железы — это процедура, при которой ткань предстательной железы замораживается и вызывает гибель раковых клеток. Во время криотерапии тонкие металлические зонды вводятся через кожу в предстательную железу.Зонды заполнены газом, который вызывает замораживание близлежащих тканей простаты.

    Криотерапия может использоваться для лечения рака предстательной железы на ранней стадии, ограниченного одной частью предстательной железы, если другие методы лечения вам не подходят. Криотерапия рака предстательной железы также может быть использована, когда рак вернулся после первоначального лечения.

    В прошлом криотерапия рака простаты ассоциировалась с более долгосрочными побочными эффектами, чем другие методы лечения рака простаты.Достижения в области технологий уменьшили эти побочные эффекты. Но долгосрочная сексуальная дисфункция по-прежнему вызывает беспокойство при таком лечении.

    Товары и услуги

    Показать больше продуктов Mayo Clinic

    Зачем это делается

    Криотерапия замораживает ткань предстательной железы. Это приводит к гибели раковых клеток простаты.

    Ваш врач может порекомендовать криотерапию рака предстательной железы в качестве опции на разных этапах лечения рака и по разным причинам.Может быть рекомендована криотерапия:

    • В качестве начального лечения рака, если ваш рак ограничен предстательной железой и другие методы лечения вам не подходят
    • В качестве лечения рака предстательной железы, который рецидивирует после первоначального лечения

    Криотерапия рака предстательной железы обычно не рекомендуется, если вы:

    • Ранее перенесшие операцию по поводу рака прямой или анальной области
    • Имеют состояние, которое затрудняет или делает невозможным мониторинг предстательной железы с помощью ультразвукового датчика во время процедуры
    • Имеют большую опухоль, которую нельзя лечить с помощью криотерапии без повреждения окружающих тканей и органов, таких как прямая кишка или мочевой пузырь

    Исследователи изучают, может ли криотерапия для лечения одной части предстательной железы быть вариантом лечения рака, ограниченного предстательной железой.Эта стратегия, называемая фокальной терапией, определяет область предстательной железы, которая содержит наиболее агрессивные раковые клетки, и воздействует только на эту область. Исследования показали, что фокальная терапия снижает риск побочных эффектов. Но неясно, предлагает ли он те же преимущества для выживания, что и лечение всей простаты.

    Риски

    Побочные эффекты криотерапии рака предстательной железы могут включать:

    • Эректильная дисфункция
    • Боль и отек мошонки и полового члена
    • Кровь в моче
    • Потеря контроля над мочевым пузырем
    • Кровотечение или инфекция в обрабатываемой области

    В редких случаях побочные эффекты могут включать:

    • Травма прямой кишки
    • Закупорка трубки (уретры), выводящей мочу из организма

    Как вы готовитесь

    Ваш врач может порекомендовать жидкий раствор (клизму) для опорожнения толстой кишки.Вы можете получить антибиотик для предотвращения инфекции во время процедуры.

    Чего ожидать

    Во время криотерапии рака простаты

    Криотерапия рака простаты проводится в больнице. Вам могут дать лекарство, называемое общим анестетиком, чтобы погрузить вас в состояние, похожее на сон. Иногда используется региональная анестезия, чтобы вы могли осознавать свое окружение, но ничего не чувствовали в области лечения.

    После того, как анестезия подействует, ваш врач:

    • Помещает ультразвуковой датчик в прямую кишку.
    • Помещает катетер в трубку (уретру), по которой моча выводится из организма. Катетер заполняется согревающим раствором, чтобы предотвратить замерзание уретры во время процедуры.
    • Вводит несколько тонких металлических зондов или игл через область между мошонкой и анусом (промежность) в простату.
    • Отслеживает изображения, генерируемые ультразвуковым датчиком, чтобы убедиться в правильном размещении игл.
    • Выпускает газ, который циркулирует через зонды или иглы и вызывает замораживание ткани предстательной железы.
    • Отслеживает и контролирует температуру игл и степень замерзания в предстательной железе.
    • Может установить катетер в мочевой пузырь через нижнюю часть живота, чтобы облегчить отток мочи после криотерапии.

    После криотерапии рака предстательной железы

    Вы, вероятно, сможете пойти домой в день процедуры или провести ночь в больнице. Катетер, возможно, придется оставить на месте примерно на две недели, чтобы обеспечить заживление.Вам также могут дать антибиотик для предотвращения инфекции.

    После процедуры вы можете испытать:

    • Болезненность и кровоподтеки в течение нескольких дней в местах введения зондов или игл
    • Кровь в моче в течение нескольких дней
    • Проблемы с опорожнением мочевого пузыря и кишечника, которые обычно проходят со временем

    Результаты

    После криотерапии рака предстательной железы вы будете проходить регулярные последующие осмотры, а также периодическое сканирование изображений и лабораторные анализы, чтобы проверить реакцию вашего рака на лечение.

    29 сентября 2021 г.

    Криотерапия ретинопатии недоношенных (КРИО-РН) – Исследование результатов криотерапии ретинопатии недоношенных – Полный текст

    РН – это заболевание глаз недоношенных детей, при котором кровеносные сосуды сетчатки увеличиваются в количестве и чрезмерно разветвляются , иногда приводя к кровоизлияниям или рубцеванию. До проведения этого исследования в 1985 г. только в Соединенных Штатах более 500 младенцев ежегодно ослеплялись из-за РН.

    Более 30 лет назад Национальные институты здравоохранения спонсировали клиническое испытание, которое показало, что если недоношенным детям давать кислород только по мере необходимости, число детей, у которых развивается РН, резко снижается. Впоследствии больницы сократили рутинную подачу чрезмерного количества кислорода недоношенным детям. Но с улучшением ухода за новорожденными за последние два десятилетия число младенцев в группе риска увеличивается по мере улучшения показателей выживаемости недоношенных детей меньшего размера. Чем ниже масса тела при рождении, тем выше частота и тяжесть РН.

    В более позднем исследовании, проведенном при поддержке NEI в Университете Майами, уровни кислорода в крови младенцев с очень низкой массой тела при рождении непрерывно контролировались с использованием чрескожных измерений, пока была необходима оксигенотерапия. Исследование показало, что нет статистически значимой разницы между показателями ретинопатии у младенцев, находящихся под постоянным наблюдением за кислородной терапией, и у детей, наблюдавшихся только тогда, когда они получали кислород, превышающий 40 процентов.

    В исследовании Supplemental Therapeutic Therapeutic Oxygen for Prethreshold ROP (STOP-ROP), также финансируемом NEI, изучалось, предотвратит ли незначительное усиление оксигенотерапии прогрессирование умеренной ROP до достаточно тяжелой, требующей хирургического лечения.Это вмешательство практически не повлияло на результаты.

    Аналогичным образом, другое клиническое исследование, спонсируемое NEI (LIGHT-ROP), продемонстрировало отсутствие защитного действия на ROP за счет ограничения воздействия света на новорожденных недоношенных детей. Эти исследования привели к выводу, что другие факторы, кроме воздействия кислорода или света, должны быть вовлечены в возникновение РН.

    У большинства младенцев, у которых развивается РН, болезнь спонтанно проходит, что позволяет развить нормальное зрение. Но другие младенцы, у которых развивается тяжелая форма РН, рискуют навсегда ослепнуть.Хотя причина РН полностью не объяснена, ученые ищут способы успешного лечения РН и определения подходящего момента в прогрессировании заболевания для применения лечения. Криотерапия, которая разрушает край сетчатки путем замораживания, является единственным лечением, которое до сих пор продемонстрировало существенную пользу для этих глаз.

    В многоцентровом испытании криотерапии РН приняли участие более 4000 недоношенных детей, вес которых при рождении не превышал 1250 г.Эта категория новорожденных подвергается наибольшему риску развития РН. Глаза младенцев, включенных в исследование, осматривали через заранее определенные промежутки времени, пока испытуемые все еще находились в отделении интенсивной терапии. После расширения зрачков глазными каплями глаза осматривал офтальмолог с помощью бинокулярного непрямого офтальмоскопа для визуализации развивающейся сетчатки. Регистрировали естественную историю состояния сетчатки каждого младенца. Когда при обследовании была выявлена ​​тяжелая форма РН (пороговая РН) на обоих глазах, и родители дали информированное согласие, один из глаз ребенка был случайным образом выбран для проведения криотерапии.В этом методе криозонд использовался для замораживания и, таким образом, разрушения периферической части сетчатки, тем самым останавливая развитие кровеносных сосудов, быстро растущих к ней.

    Результат терапии оценивали через 3 месяца и 12 месяцев после рандомизации путем обширного обследования, которое включало фотографии внутренних органов как обработанных, так и контрольных глаз. В ходе 12-месячного экзамена также измерялась зрительная функция с помощью методов предпочтительного вида. Такие измерения позволили установить корреляцию между фотографиями глазного дна и зрительной функцией, а также сравнить зрительную функцию обработанных и контрольных глаз.Ни обученные читатели фотографий, которые оценивали снимки обоих глаз, ни специально обученные тестеры зрения не знали, какие глаза подверглись криотерапии. Дополнительные оценки остроты зрения и состояния сетчатки проводились примерно каждый год вплоть до настоящего времени. В настоящее время (2001 г.) ведется подготовка к 15-летнему исследованию результатов, которое завершится к 2003 г.

    Криоконсервация клеток: что можно и чего нельзя делать

    Каковы плюсы и минусы использования криопробирок с внутренней и внешней резьбой?

    Два варианта зависят от ваших предпочтений.Некоторые исследователи выбирают конструкции с внешней резьбой, поскольку во флакон ничего не вставляется, что может помочь свести к минимуму загрязнение. Некоторые исследователи выбирают конструкции с внутренней резьбой, потому что они лучше подходят для их морозильных камер. Если кто-то использует автоматизацию, ему необходимо подумать, какую резьбу можно использовать с захватами инструментов.

    Можно ли использовать коробки из теплоизоляционного картона или пенополистирола в качестве морозильной камеры в морозильных камерах?

    Эти самодельные устройства могут работать со многими клеточными линиями.Однако они не всегда обеспечивают контролируемое, воспроизводимое или равномерное охлаждение. В результате могут быть серьезные различия в жизнеспособности флаконов при оттаивании. Поэтому мы не рекомендуем использовать для вашей культуры утепленный картон или пенополистирол.

    Что вы думаете об альтернативах ДМСО для клеточной терапии?

    Криопротекторы (CPA) можно разделить на две группы: внутриклеточные и внеклеточные криопротекторы. Внутриклеточный CPA представляет собой небольшую молекулу, которая может проникать через клеточную мембрану.ДМСО, глицерин, этиленгликоль, пропиленгликоль и банки клеток относятся к внутриклеточным CPA. Внеклеточный CPA представляет собой большую молекулу, которую добавляют в раствор криопротектора. Примерами (1) являются сахароза, декстроза, метилцеллюлоза и поливинилпирролидон (ПВП).

    ДМСО успешно используется для криоконсервации различных типов клеток, включая стволовые и дендритные клетки, которые используются для клеточной терапии. По данным литературы (2,3) , многие авторы использовали среды для замораживания, содержащие ФБС/ЧСА с 10% ДМСО.

    В качестве альтернативы криоконсервации с ДМСО и фетальной телячьей сывороткой (ФТС) исследовали использование ПВП в стволовых клетках взрослого человека, полученных из жировой ткани (4) . Автор заметил, что восстановление клеток, криоконсервированных в 10% ПВП с сывороткой человека, было сходно с клетками, криоконсервированными в ДМСО с сывороткой животных. Кроме того, они использовали метилцеллюлозу либо отдельно, либо в сочетании с пониженными уровнями ДМСО, что указывало на то, что 1% метилцеллюлоза давала сопоставимые результаты с концентрациями ДМСО всего 2% во время анализа апоптоза.

    1. Криоконсервация и ее клиническое применение
    2. Криоконсервированные мезенхимальные стромальные клетки чувствительны к апоптозу, опосредованному Т-клетками, который частично устраняется лицензированием IFNγ
    3. Зрелая дендритная клетка, полученная из криоконсервированной незрелой дендритной клетки, проявляет нарушенную способность к самонаведению и сниженный противовирусный терапевтический эффект
    4. Криоконсервация стволовых клеток человека для клинического применения: обзор

     

    У нас возникли проблемы с образованием колоний нашими иПСК после оттаивания.Как долго мы должны ждать образования колоний, и не думаете ли вы, что это проблема с нашим протоколом криоконсервации?

    Криогенная консервация клеточных культур широко используется для поддержания резервных копий или резервов клеток без связанных с этим усилий и затрат на их кормление и уход за ними. Успех процесса заморозки зависит от четырех критических областей:

    1. Состояние камеры хорошее. ИПСК следует кормить ежедневно перед криоконсервацией, чтобы получить более здоровое состояние. Клетки должны быть заморожены после пассирования в течение 2-4 дней.Разрастание может сделать плохо жизнеспособным после оттаивания. Перед криоконсервацией скопления клеток следует растворить. Криопротектор может с трудом проникать в кластер клеток, в результате чего после оттаивания выживает лишь небольшая часть клеток. Правильно обращайтесь с культурами и осторожно собирайте их. При сборе ИПСК мы рекомендуем центрифугировать при 200–300 g в течение 2 мин и аккуратно эксплуатировать пипетки. 1-2 x 10 6 клеток/мл — типичная плотность криоконсервации. Слишком высокая плотность может снизить жизнеспособность клеток.
    2. Правильное использование криозащитного средства. Наиболее распространенным криопротектором является ДМСО. Чаще всего используется конечная концентрация около 10%. Для криоконсервации иПСК некоторые исследователи также склонны добавлять в среду для замораживания FBS или фиколл. Есть также некоторые коммерческие продукты, доступные на рынке. Чтобы добиться высокой эффективности восстановления, исследователи должны использовать свежие материалы среды. Смесь криопротекторов должна быть приготовлена ​​в день эксперимента.
    3. Контролируемая скорость замораживания.Идеальная скорость охлаждения для клеток составляет -1°C в минуту. Лучший способ контролировать скорость охлаждения — использовать электронные программируемые морозильные устройства. Чтобы контролировать стоимость, исследователи могут использовать Corning ® CoolCell™. Когда клетки хранятся в криогенных флаконах Corning, флаконы можно поместить в контейнер CoolCell при комнатной температуре. Поместите контейнер CoolCell в вертикальном положении в морозильную камеру с температурой -80°C или камеру с сухим льдом.
    4. Хранение в надлежащих криогенных условиях. Морозильники с жидким азотом допускают хранение в паровой фазе над жидкостью при температуре от -140°C до -180°C.Использование хранения в паровой фазе значительно снижает вероятность взрыва протекающих флаконов или ампул во время извлечения.

    При размораживании ИПСК:

    1. Клетки следует быстро разморозить, поместив криопробирки в водяную баню с температурой 37°C.
    2. С помощью пипетки перенесите клеточную суспензию в 10-кратный объем среды по капле. Операция должна быть щадящей и медленной.
    3. Диапазон плотности посева для каждой 35-мм лунки (6-луночный планшет) составляет от 2×10 5 до 1×10 6 жизнеспособных клеток.Клетки могут прикрепляться к планшету, покрытому Corning Matrigel ® , через 30 минут после оттаивания. 70-80% слияния можно наблюдать через 24-48 часов после посева.

    У нас сейчас проблемы с получением жидкого азота. Есть ли у вас какие-либо предложения о том, как хранить наши hiPSCs без него.

    В долгосрочной перспективе я бы предложил криоконсервировать iPCS в паровой фазе над жидким азотом. Температура паровой фазы может достигать от -140°C до -180°C. Хотя -80°C является еще одной распространенной температурой для хранения клеток млекопитающих, клетки имеют тенденцию к снижению жизнеспособности в течение нескольких месяцев хранения.Исследования показали, что добавление 10% Ficoll 70 к криопротектору, содержащему 10% DMSO, приводит к заморозке клеток при температуре -80°C в течение одного года без потери жизнеспособности по сравнению с хранением в жидком азоте. Вы можете найти более подробную информацию в документе ниже.

    Эффективная долговременная криоконсервация плюрипотентных стволовых клеток при температуре -80 °C

    Наша лаборатория работала над снижением содержания ДМСО в наших средах для криоконсервации гепатоцитов. Есть ли у вас какие-либо рекомендации по снижению содержания ДМСО наряду с самыми низкими процентными значениями, которые вы видели для этого приложения.

    Имеется много сообщений о криоконсервации гепатоцитов различных видов, таких как мыши, обезьяны, собаки, крысы и люди. По данным многих источников, для криоконсервации гепатоцитов авторы использовали 10-20% ДМСО. 10% ДМСО является наиболее распространенной концентрацией в качестве минимума криопротектора для гепатоцитов. Если вас беспокоит жизнеспособность клеток, вы можете попытаться добавить олигосахариды в качестве добавки в среду для замораживания, содержащую 10% ДМСО (1) . Авторы наблюдали, что использование олигосахаридов привело к наибольшему улучшению жизнеспособности клеток с использованием метода исключения трипанового синего (ТБ).Кроме того, группа исследователей из Швеции оценила жизнеспособность клеток гепатоцитов с использованием STEM-CELLBANKER TM  (CB), который представляет собой не содержащий ксенонов раствор для криоконсервации, содержащий 10 % ДМСО, глюкозу и безводную декстрозу, по сравнению со стандартной средой 12 % DMSO-UW . (2) . Они наблюдали более высокую жизнеспособность клеток в протоколах CB, чем DMSO-UW в гепатоцитах.

    (1) Улучшение жизнеспособности гепатоцитов после криоконсервации путем добавления длинноцепочечных олигосахаридов в среду для замораживания у крыс и людей
    (2) Улучшенная криоконсервация гепатоцитов человека с использованием нового раствора криопротектора, не содержащего ксенов

    Я знаю, что это распространенная проблема, но есть ли у вас рекомендации по повышению жизнеспособности клеток после оттаивания?У нас был переменный успех, и я не уверен, почему.

    Существует множество факторов, имеющих решающее значение для успешной криоконсервации, таких как сбор клеток, криозащитные агенты (CPA), сосуды для хранения, скорость охлаждения, криогенное хранение и оттаивание. К сожалению, мы обычно замечаем проблемы с жизнеспособностью клеток, связанные с криоконсервацией, после этапов оттаивания и посева. Я бы предложил четыре основных контрольных момента, которые вам необходимо учитывать для повышения жизнеспособности клеток. Во-первых, здоровье клеток и плотность клеток имеют решающее значение, когда клетки заморожены.Чем здоровее ваши клетки, тем выше их жизнеспособность после размораживания. Мы рекомендуем 2 x 10 6 ячеек для типичного криогенного флакона Corning (номер по каталогу Corning 430661 или 430489). Если плотность клеток слишком высока, питательных веществ или CPA может быть недостаточно для поддержания здоровья клеток. Кроме того, перед замораживанием клетки необходимо избегать чрезмерного воздействия реагентов для диссоциации клеток или CPA и слишком долгого хранения при комнатной температуре во время сбора клеток. Во-вторых, когда вы переносите криогенные флаконы, содержащие ресуспендированные клетки с замораживающей средой, в контейнер для замораживания, такой как контейнер Corning CoolCell™, при температуре -80 °C, скорость охлаждения (-1 °C в минуту) является важным фактором для замораживания клеток.Вам необходимо использовать подходящий контейнер для замораживания, тип и концентрацию CPA во время замораживания клеток. В-третьих, следует избегать воздействия на клетки высоких температур во время переноса в криогенное хранилище (-196°C). Наконец, размораживание должно быть выполнено быстро, а CPA должным образом удалены, чтобы избежать токсичности или осмотического шока. Недавно я провел вебинар, посвященный общему руководству по криогенному хранению культур клеток животных. Пожалуйста, обратитесь к веб-семинару, доступному на веб-сайте Corning, с особым вниманием к отметке времени 25:27, когда я расскажу о методологии устранения неполадок, которая может повысить вашу жизнеспособность.

    (1) Общее руководство по криогенному хранению культур клеток животных
    (2) Веб-семинар

    Как повторно заморозить клетки? Мы разморозили лимфоциты после того, как получили их из другой лаборатории, а затем попытались снова заморозить часть образца, чтобы использовать его позже. Когда мы разморозили клетки, которые мы заморозили снова, мы увидели очень низкую жизнеспособность по сравнению с клетками, которые были разморожены только один раз. Этого следует ожидать?

    Несмотря на все наши усилия по оптимизации CPA и других многочисленных переменных в рамках протокола замораживания/оттаивания, криоконсервация является травматичным процессом для клеток.Поэтому следует ожидать некоторой потери жизнеспособности после процесса замораживания/оттаивания, а повторные циклы могут привести к прогрессирующей потере клеток. Вообще говоря, есть несколько факторов, которые необходимо учитывать при наблюдении за низкой жизнеспособностью клеток: здоровье и плотность клеток при замораживании, избегание длительного воздействия CPA или комнатной температуры во время сбора, контролируемая и соответствующая скорость охлаждения, избегание воздействия высоких температур во время переноса в криогенное хранение, быстрое оттаивание и надлежащее удаление CPA.Мы обрисовали это более подробно в предыдущем вопросе. Я бы также посоветовал вам проверить жизнеспособность клеток под микроскопом перед замораживанием, чтобы проверить популяции мертвых клеток в ваших сосудах. Чтобы удалить мертвые клетки, вы можете вращать РВМС с низкоскоростным центрифугированием на этапе промывки.
    В частности, для PBMC может происходить прогрессирующая потеря жизнеспособности клеток по мере увеличения времени хранения (1) . Кроме того, на криоконсервацию влияет и заболевание человека, от которого исходят РВМС.Согласно литературным данным (2) , РВМС от пациентов детского возраста, которые естественным образом инфицированы вирусом Денге, показали снижение жизнеспособности клеток после криоконсервации по сравнению со свежими РВМС от здоровых детей с использованием метода исключения ТБ.
    Я включил несколько протоколов PBMC для вашего ознакомления. Я бы уделил особое внимание центрифугированию РВМС, концентрации ДМСО и сыворотки, а также температуре замораживающей среды (3,4) .
    (1) Простой метод криоконсервации лимфоцитов
    (2) Жизнеспособность и функциональность криоконсервированных мононуклеарных клеток периферической крови при детской лихорадке
    (3) Оптимизация мононуклеарных клеток периферической крови человека (МКПК) Криоконсервация
    (4) Оптимизация восстановления замороженные мононуклеары периферической крови человека для проточной цитометрии

    Из-за covid-19 мы быстро закрыли нашу лабораторию и не смогли заморозить все наши клетки с помощью LN2.Как долго, по вашему мнению, иПСК могут храниться при температуре -80?

    Влияние хранения при температуре -80°C на клетки зависит от типа клеток. Хранение от нескольких дней до месяцев повлияет на состояние клеток после размораживания, включая жизнеспособность, свойства или экспрессию генов. Стандартной среды для замораживания 10% ДМСО недостаточно для защиты плюрипотентности клеток. Три дня хранения при температуре -80 ° C могут привести к потере 50% живых клеток и 90% -ной потере экспрессии Oct-4. Если криоконсервация продлится три месяца, повреждение усугубится.Еще есть возможность дождаться восстановления плюрипотентности после оттаивания. Но даже 14-дневная культура после оттаивания не приведет к полному выздоровлению.
    Исследователи также прилагают усилия для разработки лучших протоколов для улучшения долгосрочной криоконсервации при -80 °C. Сообщалось, что 10% Ficoll 70 в среде для замораживания может продлить срок хранения иПСК при -80 °C до одного года с сопоставимой жизнеспособностью, эффективностью посева и плюрипотентным фенотипом по сравнению с хранением LN2. Улучшения также были достигнуты в красных кровяных тельцах и периферических гемопоэтических стволовых клетках.
    Два приведенных ниже документа могут помочь вам узнать больше об этой теме.
    Криоконсервация путем медленного охлаждения с ДМСО снижает продукцию маркера плюрипотентности Oct-4 в эмбриональных стволовых клетках человека
    Эффективная долговременная криоконсервация плюрипотентных стволовых клеток при −80 °C

    Знаете ли вы о криопротекторе, не содержащем ДМСО, который подходит для замораживания образцов тканей?

    Хотя ДМСО является широко применяемым криопротектором, у этого соединения все еще есть некоторые недостатки, такие как неврологическая токсичность и генотоксичность.В случаях замораживания тканей исследователи хотели бы избегать использования ДМСО в качестве криопротектора, особенно для последующего клинического применения. Выбор альтернативных соединений зависит от тканевого происхождения и последующего применения. Многие альтернативы ДМСО были проверены при замораживании тканей, включая непроникающие криопротекторы (например, глюкоза, сахароза, галактоза или трегалоза) и внутриклеточные криопротекторы (например, этиленгликоль, пропиленгликоль, глицерин, формамид, метанол и бутандиол).Некоторые коммерческие продукты также доступны на рынке. Более подробную информацию вы можете найти в следующих ссылках.

    Успешная криоконсервация цельного яичника овцы с использованием криопротектора, не содержащего ДМСО
    Криоконсервация ткани пуповины человека без ДМСО
    Криоконсервация ткани пуповины: краткий обзор

    Каков наилучший метод размораживания образцов Т-клеток из нескольких лабораторий. Я не знаком с каждым протоколом замораживания, поэтому существует ли универсальный метод, который подходит всем?

    Описано несколько успешных протоколов криоконсервации Т-клеток.Тем не менее, лучший протокол криоконсервации для ваших Т-клеток должен быть изменен вашим собственным тестированием, поскольку существует множество факторов для успешного замораживания клеток (см. вопросы № 7 и № 8 для получения подробной информации). В качестве криопротектора многие авторы использовали 5-10% ДМСО с фетальной телячьей сывороткой (FCS) или человеческим сывороточным альбумином (HAS) и подчеркивали соответствующую скорость охлаждения (-1°C в минуту или меньше) в Т-клетках ( 1,2,3). Обратите внимание, что «имеются сообщения о потере ответа и снижении функций Т-клеток в замороженных клетках по сравнению со свежевыделенными клетками, а также о потере распознавания антигена Т-клетками, которая увеличивается с увеличением времени замораживания» (4) .

    (1) Криоконсервация первичных клеток млекопитающих
    (2) Влияние различных скоростей охлаждения и оттаивания на качество криоконсервированных Т-клеток периферической крови человека
    (3) Оптимизация и ограничения использования криоконсервированных мононуклеарных клеток периферической крови для функциональных и фенотипических Характеристика Т-клеток
    (4) Быстрое размножение Т-клеток: эффекты культивирования и криоконсервации и важность кратковременного восстановления клеток

    Существует ли наилучший способ подготовки образцов тканей к замораживанию, если после оттаивания они будут интенсивно визуализироваться? Также есть ли у вас рекомендации по оттаиванию перед визуализацией образца ткани?

    Есть несколько принципов, на которые следует обратить внимание при замораживании тканей.Во-первых, ткани следует замораживать или фиксировать своевременно, чтобы избежать морфологических искажений. Во-вторых, обязательно храните свежие ткани на льду и обрабатывайте их как можно быстрее. В-третьих, предпочтителен меньший размер выборки. В-четвертых, держите образец сухим и избегайте слишком большого количества жидкости перед замораживанием. Оттаивание образцов тканей следует проводить быстро на водяной бане при температуре 37°C. Для некоторых тканей, кровеносных сосудов и костей контроль скорости оттаивания может снизить хрупкость тканей. Помимо этого, криопротектор или процесс будут варьироваться в зависимости от органа.Вы можете найти более конкретные методы по ссылке ниже.

    Криоконсервация композитных тканей

    Могу ли я перенести клетки, которые хранились при -80, в жидкий азот напрямую или мне нужно предпринять промежуточные шаги?

    Как правило, криопробирки можно переносить при температуре от -80°C до -196°C непосредственно для длительного хранения.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.

    *